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광합성 색소의 분리

Ⅰ 서론
실험 이론
광합성 색소
광합성은 엽육세포의 엽록체(chloroplast)에서 수행된다. 엽록체의 틸라코이드 막은 빛에너지를 흡수하는데 필요한 광합성 색소를 가지고 있다. 주요 광합성 색소로는 엽록소 a(chlorophyll a), 엽록소 b(chlorophyll b)와 카로틴계 색소(carotenoids) 등이 있다. 카로틴계 색소에는 β-카로틴, 쟌토필(xantophyll), 루테인(lutein), 리코펜(lycopene)등이 있다. 광합성 색소들은 각기 특정 파장의 빛을 흡수한다. 광합성 색소들은 화학구조에서 볼 수 있듯이 대부분 지용성 분자들로 여러 가지 유기용매에 녹는 정도가 다르다.

엽록소 a 엽록소 b 리코펜


종이 크로마토 그래피(paper chromatography)
크로마토그래피는 혼합물의 분리, 분석,. 화합물의 정제, 분자량의 측정 등에 사용되는 기술이다. 크로마토 그래피는 고정상과 이동상으로 구성된다. 종이 크로마토그래피에서는 여과지가 고정상이고 전개액으로 사용되는 유기용매가 이동상이 된다. 아세톤에 녹아 있는 색소 혼합물은 모세관 현사에 의해 전개액을 따라 여과지를 이동할 때 전개액(이동상)에 용해되는 정도, 분자의 크기, 여과지(고정상)에 흡착되는 정도에 따라 이동 속도에 차이가 난다. 결국 색소 혼합물에 들어있던 색소들은 이동 속도의 차이에 의해 서로 분리된다. 따라서 전개액(유기용매)에 대한 용해도가 클수록, 분자의 크기가 작을수록, 여과지에 대한 흡착력이 작을수록 멀리까지 이동한다.



실험 목적
종이 크로마토그래피를 이용하여 시금치 잎에서 광합성 색소를 분리하고, 각 색소의 최대 흡수 파장대를 알아본다.
분광광도계(spectrophotometer)를 이용한 시료 분석 방법을 배운다.

Ⅱ 본론
실험재료
시금치 잎, 크로마토그래피용 여과지, 가위, 모세관, 막자사발과 막자, 자, 시험관, 시험관꽂이, 1회용 스포이트, 전개액(Petrolium ether : Acetone 〓 9:1 혼합액 또는 톨루엔), 아세톤, 1.5mL microfuge tube


실험방법
광합성 색소의 추출
① 막자사발에 일정량의 시금치 잎(약 5g)과 아세톤 3mL에 넣고 막자로 곱게 간다.
② 이 추출물을 1회용 스포이트를 이용하여 1.5mL microfuge tube에 넣고 침전물이 가라앉을 때까지 기다린다. 위쪽의 상징액이 색소 추출물이다.
종이 크로마토그래피를 이용한 광합성 색…(생략)

 

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