단백질 정제 레폿
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[목차]
1) 원심 분리
2) 염석과 투석
3) 겔 여과 크로마토그라피
4) 이온 교환 크로마토그라피
5) 친화 크로마토그라피
6) 전기 영동
4) 이온 교환 크로마토그라피(ion-exchange chromatography)
이온 교환 크로마토그라피는 전하를 띤 불용성 물질인 이온 교환 수지를 이용하여 이온 화합물들을 분리하는 방법이다. 이는 이온 교환 수지로 충전된 관에 분리하고자 하는 혼합물을 가하고 적당한 완충액으로 용출시키면 혼합물의 각 성분과 이온 교환 수지간의 상호 작용의 세기에 따라 각 물질의 이동속도에 차이가 생겨 서로 분리된다. 이온 교환 수지는 불용성인 합성수지, agarose, cellulose, dextran등에 양 또는 음전하를 갖고 있는 작용기를 결합시킨 것이다. 양이온과 결합할 수 있는 양이온 교환 수지는 -SO3-, -COO- 등의 음전하들 띤 작용기를 갖고 있으며 음이온과 결합할 수 있는 음이온 교환 수지는 -N+H3, -N+R3등의 양전하를 띤 작용기를 갖고 있다.
5) 친화 크로마토그라피
생물학적 활성을 지닌 대부분의 생체물질은 효소-기질간의 반응에서와 같이 특정 물질과 친화력에 의해 선택적으로 결합한다. 친화 크로마토그라피(affinity chromatography)는 물질간의 선택적 결합에 근거를 둔 것으로 많은 생체 물질, 특히 단백질의 분리 정제에 널리 이용되고 있다.
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